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区别重叠遗传密码和非重叠遗传密码,何以证明遗传密码是非重叠的?

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第1题

某研究小组正在研究单细胞纤毛虫——四膜虫的蛋白质合成,并获得有关四膜虫的一种蛋白质c端氨基酸和核苷酸部分

序列:

  I  M  Y  K  Q  V  A  Q  T  Q  L  *

  AUU AUG UAU AAG UAG GUC GCA UAA ACA CAA UUA UGA GAC UUA

  实验中遇到了一些困难,主要是不能利用网织红细胞(一种体外分析蛋白质合成的标准系统)的裂解产物来翻译经纯化的四膜虫mRNA。尽管mRNA的质量很好,但翻译产物却都是小分子多肽(图Q11.1,泳道1)。为了找出不能正确翻译蛋白质产物的原因,用来自烟草花叶病毒(TMV)编码的一个分子质量为116kDa的蛋白质的纯化mRNA进行了一系列对照实验。在体外系统中,TMV mRNA可被很好地翻译,在116kDa处显现一主带和一个极弱的约50kDa的小带(图Q11.1,泳道2)。加入四膜虫RNA后,较大分子质量的产物有显著增加(图Q11.1,泳道3)。加入一些四膜虫的细胞浆(去除了核糖体),TMV mRNA几乎专一地产生分子质量较大的产物(图Q11.1,泳道4)。令人高兴的是先前无活性的四膜虫mRNA现在似乎可以被翻译了(图Q11.1,泳道4)。去除TMV mRNA后,这种推测得到证实(图Q11.1,泳道5)。

  

  图Q11.1在来自四膜虫的各种成分加入或缺省时TMV mRNA的翻译

  请问:

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第2题

考虑下面血红蛋白α、β链协调合成的实验。家兔的网织红细胞被3H—Lys标记10min(标记时间相对一条珠蛋白单链的合

考虑下面血红蛋白α、β链协调合成的实验。家兔的网织红细胞被3H—Lys标记10min(标记时间相对一条珠蛋白单链的合成是足够的),然后离心分离带新生链的核糖体,除去可溶珠蛋白。新生珠蛋白链被胰蛋白酶消化,使肽链C端以Lys或Arg结尾,接着用HPLC(高效液相色谱)分离出这些肽并测定它们的放射性。图Q11.2为每条肽链中相对Lys残基的位置的放射性标志图。

  

  图Q11.2 α-珠蛋白、β-珠蛋白的合成

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第3题

细菌中的终止密码子是由两种蛋白质中的一种解读的。释放因子1(RF1)识别UAG和UAA,而RF2则识别UGA和UAA编码RF1

和RF2的基因已被克隆和测序。比较了编码RF2的基因核苷酸序列与蛋白质的氨基酸排列顺序后,有一惊人的发现,如图Q11.4中基因图谱所示,终止密码包含在基因序列之中。为排除干扰,基因和蛋白质的序列已经过仔细的检查。请问:

  

  图Q11.4 RF2基因图

  粗线表示编码序列,开始和结束处的序列作为参照

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第4题

蛋白质合成的整体准确性是很难衡量的,一方面,因为极端的准确和错误都是罕见的,而且细胞似乎能够很快消灭它

们的错误;另一方面,技术上也有困难。比如能够确切鉴定一种蛋白质到哪种程度,从概念上说,这与知道如何提纯、鉴定是两码事。解决这个问题的一个聪明的方法是利用细菌鞭毛虫惟一蛋白:鞭毛蛋白(相对分子质量为40000)。鞭毛蛋白有两个优点:首先,鞭毛(即鞭毛蛋白)能被从细菌上切下并用差速离心纯化,另外,鞭毛蛋白中不含Cys,因此允许利用Cys错误加入肽链进行灵敏的检测。为了放射性标记Cys,细菌在含(放射活性为5.0×103cpm/pmol)和过量的未标记Met的生长培养基中恰好生长一个世代(这种情况下无可测出的放射性进入Met),把所得的鞭毛蛋白纯化并进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,发现从凝胶上回收的8μg鞭毛蛋白中含有35S带来的放射性为300cpm。请问:

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第5题

简述最初证明遗传密码一般性质的实验。

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第6题

在用T4噬菌体rⅡB突变体进行的实验中,Crick和Brenner将不同的单碱基插入或单碱基缺失突变重组到单一基因型的

菌株中。大多数双重突变体为野生型,而其他仍然是rⅡB突变型,解释原因。

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第7题

在体外的蛋白质合成系统中,多聚(AC)刺激苏氨酸和组氨酸掺入多肽链,而多聚(AAC)可产生多聚天冬氨酸,多聚苏氨

酸和多聚谷氨酸。从中判断哪一个密码能被确定编码哪一个特定的氨基酸?

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第8题

MS2噬菌体含有一单链的RNA,既是染色体又作为信使。下面是编码蛋白质外壳基因开始的一段序列及蛋白质外壳相应

的N端氨基酸序列:

  密码  1  2  3  4  5  6  7  8  9  10

  核苷酸 AUG GCU UCU AAC UUU ACU CAG UUC GUU CUC …

  氨基酸   Ala -Ser -Asn -Phe -Thr -Gln -Phe -Val -Leu …

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第9题

许多自发突变涉及DNA中单碱基的置换,而且当它们发生在编码序列之内时可能引起多肽中单个氨基酸的置换。当Try

被其他氨基酸替代时可能是由于哪些单碱基的置换?

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第10题

一种野生型E.coli菌株的一种蛋白质的108位为Val残基,分离出三种突变体(A、B和c)发现它们在这个位置分别是Gly

、Glu和Leu。A和B的回复突变株中这个位置上的氨基酸分别是Trp和Lys,突变C没有做进一步的实验,解释上述结果并推测6种菌株中该位置上的密码。

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