涉DNA复制直接移动。你的想法是根据这两种机制的主要不同点:如果不复制,那么转座子的两条亲链将同时移动;如果复制,则只有一条亲链移动。你打算把来自两个不同Tn10的链经退火后都标记上。为了把这些杂种Tn10双螺旋足够地分配到细胞中。你用了含有Tn10的λ噬菌体DNA,它既能在体外操作又能包在病毒壳内成为有侵染力的噬菌体。你决定使用一个因为其他突变而失去活性的噬菌体基因组,因此它就不会复制整合,而且最终可被除去,这样噬菌体基因组可被忽略。你的噬菌体DNA在同样位点插入了稍微不同的Tn10。两种Tn10都含有四环素抗性基因和乳糖代谢基因(lacZ),但其中一种由于突变使lacZ基因失活。这种差异为追踪两种Tn10提供了一个很方便的方法,
转座因子被示为一条杂合双链,由两条遗传上不同的链组成——一条白色、一条黑色。在复制转座期间,一条链与供体DNA留在一起,一条被转向受体DNA;在非复制转座时,转座子被从供体DNA上切下,全部转到受体DNA上因为lacZ+细菌克隆(与适当的底物共育时)会变蓝,而lacZ-克隆则还是白色。你把两种噬菌体DNA的混合物变性后退火,得到两份相等的杂交双链与纯合双链的混合物。然后你将混合物包装到噬菌体外壳中,侵染lacZ-细菌,并把被侵染细菌涂布在含四环素和可产生有色底物的平板上。一旦噬菌体DNA进入了细菌,转座子将进入细菌基因组(频率很低),给细菌带来四环素抗性。获得一个Tn10的稀有野生细菌,可以在选择条件下生存并形成克隆。统计大量这样的克隆会发现有25%为白色,25%为蓝色,50%为蓝色部分与白色部分的混合物。
第2题
细菌______或称噬菌体,它们只侵染单个细胞。大多数噬菌体能够在其宿主细胞中形成潜伏感染,称为______。这时细菌与噬菌体均能保持正常的增殖。噬菌体-细菌之间的溶原性是______的,即特定病毒可以在一种细菌中裂解(烈性噬菌体),也可以以与裂解相反的方式______溶原的形式存在于另一种细菌中(温和噬菌体)。
研究最为详尽的温和噬菌体是T-偶数噬菌体和λ噬菌体。一旦感染了宿主(即噬菌体双链DNA的注入),λ噬菌体的DNA进行______,在______的协助下λDNA以______交换的形式整合到细菌的基因组中。λ噬菌体保持溶原状态还是进入裂解期是由两种蛋白质的浓度决定的:______和______(或称______)。这两种蛋白质同时竞争同一转录______的结合位点,该______有位于两个相反方向的启动子PRM(左向)和PR(右边)。PRM起始______(cI)的转录,PR起始右向转录生成cro转录本。______与操纵基因OR1和OR2有高亲和力,可使从PRM起始的cI基因的表达产生正自调节。另外,若______能够与OR1和OR2区结合,可以阻止______与OR3和R3操纵基因区结合,同时也阻止______从PR(与OR1有部分重叠)起始cro基因的表达。与此相反,Cro蛋白与操纵基因______和OR2有较高的亲和力,可以阻止λ阻抑蛋白与操纵基因OR1和OR2结合,而λ阻抑蛋白与操纵基因OR1和OR2结合是从PRM(与OR3部分重叠)起始的基因表达所必需的。从本质上说,______蛋白与______蛋白的比例升高会抑制从PR起始的转录,因此噬菌体保持______,如果______的被降解会使噬菌体进入______。
第4题
λ原噬菌体的晚期基因的表达依靠( )。
A. 聚合酶、σ因子、σRE,从启动子PRE起始转录
B. 抗终止:N因子允许从启动子PR开始转录的继续
C. 抑制:Cro蛋白抑制从启动子PR开始的转录
D. 抗终止:Q因子允许从启动子PR开始转录的继续
F. 以上全不对
为了保护您的账号安全,请在“上学吧”公众号进行验证,点击“官网服务”-“账号验证”后输入验证码“”完成验证,验证成功后方可继续查看答案!