限制性内切酶在分子克隆中起有的作用是？

A.限制性内切酶在特定的位置上切割质粒和供体DNA分子

B.载体DNA和供体DNA在连接酶的作用下末端相连形成重组DNA

C.除质粒外，入噬菌体可作为重组DNA的载体

D.筛选含重组DNA的细菌通常可根据载体对抗生素的抗性来进行

E.以质粒为载体构建的重组DNA分子引入宿主细胞时需与宿主DNA结合

下列对DNA克隆操作的描述哪一项是错误的

A．限制性内切酶在特定的位置上切割质粒和供体DNA分子

B．载体DNA和供体DNA在连接酶的作用下末端相连形成重组1DNA

C．除质粒外，λ噬菌体可作为重组DNA的载体

D．筛选含重组DNA的细菌通常可根据载体对抗生素的抗性来进行

E．以质粒为载体构建的重组DNA分子引入宿主细胞时需与宿主DNA结合

下列对DNA克隆操作的描述哪一项是错误的

A．限制性内切酶在特定的位置上切割质粒和供体DNA分子

B．载体DNA和供体DNA在连接酶的作用下末端相连形成重组DNA

C．除质粒外，λ噬菌体可作为重组 DNA的载体

D．筛选含重组DNA的细菌通常可根据载体对抗生素的抗性来进行

E．以质粒为载体构建的重组DNA分子引入宿主细胞时需与宿主 DNA结合

你打算将一个具有Kpn Ⅰ末端的DNA片段克隆到具有BamH Ⅰ末端的载体中。问题是BamH Ⅰ和Kpn Ⅰ的末端是不匹配的，BamH Ⅰ是5'突出端，Kpn Ⅰ则是突出的3'端(图Q25.7)。一位朋友建议用图Q25.7所示的寡聚核苷酸“片段”来进行连接。你并没有马上意识到这种方法可行，因为你想到的连接作用需要邻近的5'磷酸和3'羟基。虽然寡聚核苷酸分子被限制性内切核酸酶切割后会产生合适的末端，但是，合成的寡聚核苷酸的末端都是羟基。另外，虽然图Q25.7中接头是BamH Ⅰ-Kpn Ⅰ，但另一个接头却是Kpn Ⅰ-BamH Ⅰ。所以你怀疑相同的寡聚核苷酸是否能够适合这两种方式的连接。

  

  图Q25.7用一种寡聚核苷酸片段连接不互补的限制性末端的图解