请设计目的基因的实时荧光定量PCR的引物，将设计好的引物上传至爱课程平台。

A、两条引物的Tm值相差尽量大

B、尽量避免引物二聚体的出现

C、反应体系中引物的浓度一般在0.1~0.2μmol/L之间

D、引物过长可能提高退火温度

荧光定量PCR检测因为具有自动化程度高、易于标准化、产物闭管检测减少污染、定量报告检测结果等诸多优点，现在临床检验中应用越来越广泛，它与常规PCR相比在很多方面都有其特点。荧光定量PCR方法中不是基于FRET原理设计的是A、双链DNA染料结合法

B、水解探针法

C、分子信标法

D、杂交探针法

E、荧光标记引物法

检测原理利用了Taq酶5′→3′外切酶活性的是A、双链DNA染料结合法

B、水解探针法

C、分子信标法

D、杂交探针法

E、荧光标记引物法

荧光定量PCR方法中最容易出现假阳性的是A、双链DNA染料结合法

B、水解探针法

C、分子信标法

D、杂交探针法

E、荧光标记引物法

与常规PCR相比，荧光定量PCR的缺陷是A、定量仅根据指数扩增期

B、灵敏性太高

C、降低了携带污染

D、无法检测扩增子大小

E、增加了实验室污染的概率

关于外标法荧光定量PCR错误的是A、为了定量准确，外标法标准曲线需要5个点以上，还需设阴性对照和阳性对照

B、被检标本与标准品扩增效率之间的不一致会影响定量准确性

C、是目前临床实验室应用最广泛的一种方法

D、DNA标准品常是含有待测基因的一定浓度的质粒

E、对于RNA病原体，标准品通常是一定浓度的RNA

PCR技术中，扩增引物的设计无需考虑

A、引物长度

B、靶序列长度

C、引物二聚体形成

D、引物自身杂交

E、引物3′端内的已知靶序列或未知靶序列

A、Green Premix Taq enzyme

B、模板cDNA

C、RNA

D、上下游引物及Reference Dye

在荧光定量PCR中能够使得SYBRGreen发光的是()

A.特异性扩增的产物

B.非特异性扩增的产物

C.引物二聚体

D.双链DNA模板

简并引物PCR主要是根据蛋白质的氨基酸序列设计______引物来合成相应的基因。

关于定量PCR，错误的是

A、可以定量或半定量检测PCR产物的方法

B、定量PCR主要进行基因表达的分析和病原体的核酸检测

C、水解探针技术中TaqMan探针的位置位于两条引物之间

D、分子信标在自由状态下为发夹结构，荧光信号极低

E、定量PCR在封闭状态下进行，有效避免了产物的实验室污染

对于镰状细胞贫血病的突变机理可以采用的基因诊断方法不可以是(  )

  A．设计等位基因特异性引物进行PCR

  B．测序

  C．PCR与限制性核酸内切酶技术结合

  D．核酸分子杂交

  E．在突变位点两侧设计引物再电泳分析PCR产物长度变化