A.酵母单杂交技术
B.DNA酶足迹法
C.凝胶阻滞分析
D.酵母双杂交技术
第2题
A.敏感性高
B.能真实反应细胞内蛋白质间相互作用情况
C.使蛋白质表现型和基因型相联系
D.不需分离靶蛋白
E.可以筛选cDNA文库
第3题
选择出不含LexA-Ras质粒,仅含VP16-cDNA质粒的“痊愈”细胞,这些细胞可用在缺乏组氨酸的平板上检查是否生长和在有XGAL存在时的显色情况而被挑选出来。那些不能在组氨酸平板上生长和有XGAL存在时形成白色菌落的“痊愈”细胞用LexA-核纤层蛋白质粒转化,并再次在上述平板上测试生长,只有那些在缺乏His的平板上不生长且形成白色菌落(含XGAL)的含LexA-核纤溶蛋白基因质粒的细胞可用于进一步分析。
在1.4×106个原始转化体中仅有19个菌落满足详细分析的严格标准。再测定每种细胞中插入到VP16基因片段的下游的cDNA序列时,将发现:9个菌落(克隆)均有插入的cDNA,均与Raf丝氨酸/苏氨酸激酶的N末端相对应,6个与C-Raf对应,3个与A-Raf对应。
这是一个令人兴奋的发现,因为其他的工作仅能显示Raf的免疫沉淀物可使MAP-激酶磷酸化而激活,如果Raf真能与Ras结合,我们就能找到GTPase单体与MAP-激酶之间的级联中所缺少的一环。
为了验证上述发现所暗示的相互作用是否正确,可构建一些含融合蛋白基因的质粒,如麦芽糖结合蛋白与Raf间的融合蛋白(MBP-Raf)、谷光甘肽-S-转移酶和Ras的融合蛋白(GST-Ras),之后让这两种融合蛋白质粒在细菌中扩增,在直链淀粉亲和柱上通过它们的混合物检验他们结合的能力,而直链淀粉亲和柱可与MBP-Raf结合。用麦芽糖洗脱被束缚的蛋白质,这时会发现一条明显的GST-Ras蛋白随着MBP-Raf蛋白一起洗脱的曲线。这个结论为双杂交系统的遗传学结论提供了生化证据。
第4题
选择出不含LexA-Ras质粒,仅含VP16-cDNA质粒的“痊愈”细胞,这些细胞可用在缺乏组氨酸的平板上检查是否生长和在有XGAL存在时的显色情况而被挑选出来。那些不能在组氨酸平板上生长和有XGAL存在时形成白色菌落的“痊愈”细胞用LexA-核纤层蛋白质粒转化,并再次在上述平板上测试生长,只有那些在缺乏His的平板上不生长且形成白色菌落(含XGAL)的含LexA-核纤溶蛋白基因质粒的细胞可用于进一步分析。
在1.4×106个原始转化体中仅有19个菌落满足详细分析的严格标准。再测定每种细胞中插入到VP16基因片段的下游的cDNA序列时,将发现:9个菌落(克隆)均有插入的cDNA,均与Raf丝氨酸/苏氨酸激酶的N末端相对应,6个与C-Raf对应,3个与A-Raf对应。
这是一个令人兴奋的发现,因为其他的工作仅能显示Raf的免疫沉淀物可使MAP-激酶磷酸化而激活,如果Raf真能与Ras结合,我们就能找到GTPase单体与MAP-激酶之间的级联中所缺少的一环。
为了验证上述发现所暗示的相互作用是否正确,可构建一些含融合蛋白基因的质粒,如麦芽糖结合蛋白与Raf间的融合蛋白(MBP-Raf)、谷光甘肽-S-转移酶和Ras的融合蛋白(GST-Ras),之后让这两种融合蛋白质粒在细菌中扩增,在直链淀粉亲和柱上通过它们的混合物检验他们结合的能力,而直链淀粉亲和柱可与MBP-Raf结合。用麦芽糖洗脱被束缚的蛋白质,这时会发现一条明显的GST-Ras蛋白随着MBP-Raf蛋白一起洗脱的曲线。这个结论为双杂交系统的遗传学结论提供了生化证据。
第6题
1. 营养物质和药物主要吸收部位是() A. 小肠 B. 大肠 C. 胃部 D. 直肠 2. 下列说法错误的是() A. 人肝细胞系体外模型易于培养但是表达水平低 B. 肝切片体外模型细胞相互作用不受影响,能够进行形态学研究 C. 转基因细胞系体外模型能够完全反应体内环境 D. 人肝微粒体体外模型不适宜定量测定 3. 组织分布实验一般采取() A. 小鼠或大鼠 B. 家兔 C. 狗 D. 猴 4. 能够表示药物分布特性的是() A. V B. C C. X D. L 5. (多选) 一种药物能否口服取决于药物的()能力 A. 药物在胃肠道的物理化学稳定性 B. 肠道菌群酶系与肠道上皮酶系对药物的代谢及屏障作用 C. 药物透过胃肠道黏膜的能力 D. 药物在组织器官中的分布 6. (多选) 影响血脑屏障中药物的转运的因素为() A. 与血液成分的相互作用 B. 局部脑血流量 C. 血脑屏障固有的转运能力 D. 脑细胞内药物的结合 7. (多选) 研究药物—蛋白结合的实验方有() A. 平衡透析法 B. 超滤法 C. 超速离心法 D. 色谱法 8. 一般Kp值越大,表示药物在组织中分布越多() √ × 9. 研究动物体内药物分布主要有三种方法() √ × 10. 脂溶性是评价药物透膜能力最重要的理化参数() √ × 11. 临床前药动学研究,同一受试动物多次采样,不得少于()只动物数据 A. 2 B. 3 C. 4 D. 5 12. 临床前药动学研究,组织分布试验一般选用()为试验动物 A. 豚鼠 B. 大鼠或小鼠 C. 猪 D. 猴 13. 临床前药动学研究,整个采样时间至少应持续到()个药物半衰期,或持续到血药浓度为Cmax的() A. 3-5,1/10-1/20 B. 3-6,1/10-1/20 C. 3-5,1/20-1/30 D. 3-6,1/20-1/30 14. 精密度测定中,一般RSD小于()%,在定量限附近,RSD应小于()% A. 15,20 B. 20,25 C. 25,30 D. 30,35 15. (多选) 尿排泄实验中适用于小鼠采尿的方法是 A. 代谢笼法 B. 导尿法 C. 压迫膀胱法 D. 反射法排尿收集尿液 16. (多选) 生物样品前处理方法() A. 样品均匀化 B. 沉淀蛋白 C. 被测组分的萃取分离与浓集 D. 冷冻干燥 17. (多选) 群体药代动力学的应用() A. 个体化给药 B. 群体药效学研究 C. 药物生物利用度研究 D. 新药开发和临床评价 18. 标准曲线的线性程度与线性范围中,标准曲线不包括零点,至少应有6个浓度点,色谱法r的绝对值>0.99,生物检测方法r的绝对值>0.98() √ × 19. 大鼠采尿可以用反射法排尿收集尿液() √ × 20. 生理药动学模型可描述任何器官或组织内药物浓度的经时变化() √ ×
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